1. När du bestämmer endotoxin i blod, var uppmärksam på valet av metoder och reagens.

2. Beredning av plasma eller serum

Som ett vanligt kliniskt prov är plasma huvudprovet, och dess utnyttjandegrad är mer än 95%. Därför är det mycket viktigt att förbereda plasma som huvuddelen av kroppsvätskan. Enligt Das är endotoxin i allmänhet fäst till trombocyter utöver sitt fria tillstånd, så det är mer lämpligt att använda plasma som innehåller ett stort antal blodplättar som ett prov. När man förbereder humanplasma eller animaliskt plasma, för att förhindra cellskador, använder främmande länder för det mesta lågtemperaturseparation, med plasmaprover som innehåller ett stort antal blodplättar, det vill säga vid 4 ℃ 1000gx10 minuters separationsförhållanden, eller 3000gx40 sekunders separationsförhållanden när det inte finns någon lågtemperaturcentrifug. Det är inte tillåtet att utföra höghastighets- och långtidsseparering under normala temperaturer. Dessutom bör bakteriell kontaminering undvikas vid separering av plasma eller serum.

Beredning av serum: använd en spruta utan antikoagulantia för att samla upp blod och överför det till ett centrifugrör och placera det i ett isvattenbad i 30 minuter, vid 4 ℃, 1000xg, 10 minuter för centrifugering.

Efter separation av plasma eller serum, om det inte används tillfälligt, kan det frysas vid -80 ℃ och användas inom 1 månad. Observera För att undvika adsorption av endotoxin, använd ett provrör i glas för förvaring.

3. Typer och effekter av antikoagulantia

Under beredningen av plasma, på grund av tillsatsen av vissa antikoagulantia, har typen och mängden av antikoagulantia en stor inverkan på återvinningshastigheten. Allmänt sett inkluderar vanliga antikoagulantia huvudsakligen heparin, natriumcitrat och EDTA, bland vilka heparin är det mest använda. Vi vet dock att en stor mängd heparin kommer att störa endotoxinreaktionen, särskilt för utspädningsuppvärmningsmetoden och kloroformextraktionsmetoden, vilket kommer att minska återvinningshastigheten, men har mindre inverkan på PCA-metoden, så mängden heparin som tillsätts och frigörs under plasmaberedning behöver bara 2~5 μ L/ml räcker.