Efter beredningen av immunkolloidalt guld måste det spädas till en viss koncentration och adsorberas i speciella inerta medier för att göra produkten. I allmänhet används speciella medier vanligtvis som glasfiber eller fibertyg. Glasfiber och fiberduk är i allmänhet hydrofoba, och den kolloidala guldindustrin använder vanligtvis ytaktivt förbehandlad glasfiber eller fiberduk, vanligtvis är formeln 1% Tween20 måttlig PVA. Efter mediabehandling är kompatibiliteten hos immunkolloidalt guldutspädning den mest kritiska. De nuvarande sammanfattningsprinciperna sammanfattas enligt följande:
1. Lämplig jonart och styrka
När allt kommer omkring, immun e kolloidalt guld innehåller bioaktivt molekyler, och den möter också många olika prover när den appliceras. I princip behöver den spädas i en buffert med lämpligt PH. Det empiriska värdet är 6-9. De valfria buffertarna i detta intervall är huvudsakligen Tris och PB, och de utesluter inte andra typer av buffertar. När buffertjonstyrkan som används är för stor mer än 0,2M kan det orsaka dålig frisättning, dålig kromatografi eller onormala detekteringsresultat. Mångfalden av joner har också många begränsningar på grund av de olika biomolekylerna av immunkolloidalt guld, såsom calmodulin kan vara relaterat till Ca 2 -joner. Halogenjonstyrkan verkar ha en speciell destruktiv effekt på det kolloidala guldets stabilitet, såsom lärobokens optimala märkningsförhållanden för NaCl-felsökning.
2. Makromolekylärt material fungerar som jämnt spridda skelett av torkat kolloidalt guld
Detta är faktiskt den teoretiska grunden för frystorkningsprocessen, som är lämplig för den kolloidala guldtorkningsprocessen. De som har studerat frystorkning bör känna sig väldigt liten inför denna process. Vakuum är en termodynamisk endoterm process. Erfaren visar att vakuumtorkning av kolloidalt guld är en process av frysning och sedan sublimering, vilket är mycket likt lyofilisering. På grund av den snabba torkningsprocessen använder non-woven material det mesta av torkningsprocessen, men makromolekylernas skelettverkan är fortfarande till stor hjälp för frisättningshastigheten och förhållandet mellan produkten. Vanligt använda makromolekylära ämnen som PEG4000, PEG20000, PVP, etc., rekommenderas att välja en så långt det är möjligt.
3. Litet molekylärt material för skydd mot proteinaktivitet
Glycerol, sackaros, trehalos och olika oligosackarider som vanligtvis används vid proteinlagring är till hjälp för lagringsstabiliteten hos produkter. Att ignorera tillsatsen av dessa ämnen kan begränsa produktionen och marknaden av produkter från laboratoriet. Dessa ämnen används också ofta av frusna stamceller.
4. Inert protein
Funktionerna hos sådana ämnen är ännu mer komplexa. Först och främst skyddar det aktiviteten hos målproteinet och upprätthåller kolloidalt gulds kolloidala stabilitet. De eliminerar ospecifika slutna ämnen och spelar även skelettets roll som dispergerade kolloidala guldpartiklar. Ofta använt BSA, OVA, Kasein, och annat billigt protein verkar inte vara lätt att hitta, skummjölkspulver personlig rådgivning, kvaliteten är för svår att kontrollera, naturligtvis, om du har använt det och effekten är bra, där behöver du inte oroa dig för mycket.
5. S ytaktivt medel
Denna sak är absolut oumbärlig i denna industri, men adsorptionsmaterialet har förbehandlats med ytaktivitet eller kan inte tillsättas till det immunokolloida guldspädningsmedlet. Under normala omständigheter är Tween20 ok, faktiskt, proteinreglering som ofta används av icke-joniska ytaktiva ämnen kan prova, för en tid sedan sa en hög person att TritonX-100 kan störa N-änden av proteinet används inte, jag lyssnade inte mycket förstå, här vänligen ge råd.
6. Annat
Produktarter skiljer sig åt, ovanstående fem typer av material, legend och vissa kan "förbättra produktens känslighet", "förbättra produktdetektering linjärt område", "tvingad konvertering * * detektion bästa cut-off område", "HAMA effekt inhibering" och "linje tidsdjup ändra slut" såsom mystiskt tillägg, utesluter teoretiskt sett inte möjligheten, men ofta är ett "gud" effektivt intervall mycket snävt, det vill säga, en "gud" kanske bara gäller för ett företag en antikropp av en produkt , en annan miljö är ogiltig. Jobbet som letar efter gud är ofta senior teknisk personal på ett stort företag med forsknings- och utvecklingstyp, och gudarnas kontroll är ofta som företagshemligheten.