Den stationära låghastighetsfryscentrifugen används i laboratoriet för primär separation och extraktion av biologiska makromolekyler, sediment etc. Dess vridbara huvud är huvudsakligen tillverkat av aluminiumlegering, som är av platt typ och vinkeltyp. Centrifugalröret är tillverkat av hårt glas, polyeten hårdplast och rostfritt stålrör. Centrifugen är utrustad med en drivmotor, en timer, en regulator (hastighetsindikator) och ett kylsystem (justerbart temperaturområde är -20~ 40 ℃), som kan ersätta de roterande huvudena med olika kapaciteter och olika typer av rotationshastigheter enligt till behoven hos centrifugalmaterialet.

Detaljerade steg för centrifugering för extraktion av cytoplasmatiska och nukleära proteiner med låghastighetsfryscentrifug:

1. Bestäm celltillväxttillståndet. Celltillväxttillståndet bör vara 80 % eller bättre:

2. Centrifugera vid 1500 r/min i 5 min

3. Kassera supernatanten, tvätta cellerna med lika volym kall PBS och upprepa 3 gånger som i steg 2

4. Enligt den uppskattade nederbördsmängden, tillsätt 5 gånger av volymen isotoniskt sisbuffert i cellpartiklarna för att få cellerna att suspendera försiktigt och undvika skum så långt som möjligt

5. Tillsätt lysisbuffert i de suspenderade cellerna och lägg den på isen i 15 minuter för att låta cellerna expandera, vilket kan kontrolleras med mikroskop

6. För de expanderade cellerna i cellexperimentet, tillsätt 10 % IGEPALCA-630 för att få den slutliga koncentrationen att nå 0,3 %, blanda väl och tillsätt försiktigt

7. Centrifugera omedelbart (använd 1,5 ml EP-rör vid 5500r/min i 30s för stora mängder; använd 50ml rör vid 5500r/min i 2min för stora mängder)

8. Överför supernatanten (cytoplasmatiskt protein) till ett nytt frysrör

9. Suspendera celler med 5 gånger volymen suspenderade partiklar i isotonisk buffert och blanda väl

10. Centrifugera cellsuspensionen vid 1500 r/min i 5 min och ta bort supernatanten

11. Suspendera partiklar med 2/3 gånger volymen extraktionsbuffert

12. Placera röret på den vibrerande mixern, skaka och blanda vid 700 r/min i 15 min, och sedan vid 1400 r/min i 15 min. Hela processen bör vara noga med att undvika skum

13. Centrifugera vid 9400 r/min i 15 minuter, överför supernatanten till ett nytt fruset centrifugrör efter lågtemperaturcentrifugering

14. Dela upp i flera delar och frys in dem med flytande kväve och förvara dem (långtidslagring bör vara vid - 80 ℃, korttidsförvaring bör vara vid - 20 ℃)