Generellt sett, på grund av blodets komplexa sammansättning, har många ämnen, särskilt plasma eller serum från högre djur, en stark interferenseffekt på reaktionen mellan TAL (LAL)-reagens och endotoxin. När vi testar endotoxinet i sådana prover måste vi därför ta bort de störande ämnena innan vi testar.

För närvarande inkluderar de störande substanserna i plasma huvudsakligen olika proteashämmare, endotoxinbindande proteiner och plasminogenhämmare. För kolorimetri kan faktor Xa sönderdela Boc-LEU-Gly-Arg-PNA-peptidkedjan. Därför är det nödvändigt att eliminera dessa störande ämnen före bestämning.

Förbehandlingsmetoderna för att ta bort störande ämnen i blodet är följande:

(1) Spädningsuppvärmningsmetod: plasma späds 3~10 gånger med löst vatten och värms sedan upp i 37~100 ℃ vatten. Hålltiden är vanligtvis 5~10 minuter;

(2) Kloroformextraktionsmetod: tillsätt samma mängd kloroform till plasman och vibrera i 3 timmar, ta sedan det övre lagret för upptäckt;

(3) Eterbehandlingsmetod: tillsätt eter till plasma för behandling och avlägsna eter vid 40 ℃;

(4) Trifluorättiksyrametod: tillsätt ättiksyra i en plasma för att justera pH 4,0 och använd sedan K2HPO4 för att justera pH till 7~7,5;

(5) Behandlingsmetod för ytaktiva ämnen: liksom utspädningsuppvärmningsmetoden ändras endast utspädningsvattnet till ytaktivt ämne;

(6) Gelfiltrering;

(7) Alkalisk behandlingsmetod: plasman hölls vid 0,2NNaOH 37 ℃ i 10 minuter och neutraliserades sedan med HCl;

(8) Perklorsyrametod (PCA) eller ny perklorsyrametod (Ny PCA);

(9) Beads-metod: sätt in det speciella hartsabsorberande endotoxinet i plasman, ta ut det och tillsätt LAL-reagens för reaktion.

Bland dessa metoder är de vanligaste metoderna kloroformextraktionsmetoden, spädningsuppvärmningsmetoden, perklorsyrametoden (PCA) och metoden med ny perklorsyra (Ny PCA). De två första metoderna måste diskuteras under bestämningen på grund av förekomsten av endotoxinåtervinningshastighet, falska positiva och andra problem. PCA-metoden (New PCA-metoden), på grund av den goda återvinningsgraden av tillsatt endotoxin, används för närvarande främst vid preklinisk behandling i Japan.